肉仔鸡疑似禽传染性脑脊髓炎的诊断

鸡传染性脑脊髓炎是一种由病毒引起的主要侵害幼雏中枢神经系统，以共济失调、头颈震颤、站立不稳为主要症状，非化脓性脑炎为主要病变的急性、高度接触性传染病。2003年3月，某鸡场饲养的商品肉仔鸡（20天龄左右）陆续出现以共济失调，不喜欢走动、嗜睡、头颈震颤为特征的病例。通过流行病学调查，结合临床症状、病理剖检变化和实验室检查，初步诊断为鸡传染性脑脊髓炎。现将情况报道如下。一、流行病学调查2003年2月25日，某鸡场购进石歧杂鸡苗5000只，3月12日部分小鸡开始发病。最初几天每天死亡20～50只，3月16日之后发病率及死亡率剧增。曾怀疑暴发新城疫，紧急接种新城疫Ⅳ系疫苗，5羽份/只，结果发病率及死亡率均未见降低，死亡最高的一天为210只；随着小鸡日龄的增大死亡率逐渐减少，40天龄以上的鸡只除极少数头颈轻微颤抖外，其他基本正常，累计死亡率达28%～30%。该场小鸡的免疫接种程序是：1天龄颈皮下接种马立克氏病疫苗，1羽份/只；3天龄滴眼接种新支二联疫苗，1羽份/只；8日龄饮水免疫接种传染性囊病疫苗，1羽份/只；13天龄饮水免疫接种新城疫Ⅳ系疫苗，2羽份/只；25～28天龄肌注接种新城疫I系疫苗，1.5羽份/只。二、临床症状发病雏鸡大多数表现迟钝，目光呆滞，精神沉郁，嗜睡，拉稀；站立不稳，不喜欢走动而喜欢蹲坐于跗关节上，驱赶可勉强走动，但脚发软，步伐和速度失去控制，张开翅膀以保持平衡，最终倒卧一侧无法站立；腿、翼，尤其是头颈部可见到明显的阵发性音叉式的震颤，尤其受到惊扰和刺激时表现明显。病雏在早期仍能自行采食和饮水，随着病情的加重就再不能走动和站立，常常倒卧在食槽旁，由于卧地得不到食物和饮水而渐渐虚脱，虽然常有啄食动作，但食量很少，同时受到鸡群的践踏，大部分病鸡以死亡为转归。三、病理变化剖检部分病、死鸡，大部分脑部水肿，有的脑部有出血点；肌胃肌层中有细小灰白区。其他脏器未见有明显肉眼病变。四、实验室诊断1.病原分离：以无菌操作取具有典型症状的病鸡的脑、肝、脾研磨成匀浆，用PBS按1∶5稀释，反复冻融2～3次，将病料分成两份，一份留下作为接种鸡只，另一份以4000转/分离心10分钟，取上清液，按2500单位/毫升各加入青霉素、链霉素，置4℃冰箱作用3～4小时。无菌检查合格后，尿囊腔接种8天龄鸡胚6只，0.2毫升/只，于37℃温箱培养。每天照胚4次，观察并记录鸡胚死亡情况。结果胚胎于24小时内死亡的占1/6，48小时死亡的占3/6，72小时死亡的占1/6，未死的鸡胚占1/6。无菌操作收集48～72小时死亡鸡胚的尿囊液，并将收获的鸡胚尿囊液接种普通琼脂斜面，置37℃培养48小时，未见细菌生长。观察死亡的胚体，见胚体有出血点，脑部水肿。2.红细胞凝集试验（HA）：反应板1～12孔红细胞全部沉降于孔底呈圆点状，无凝集反应。结果表明收获的鸡胚液不含可凝集鸡红细胞的病毒，因此可排除新城疫及禽流感。3.动物接种试验：（1）将病料悬液肌肉注射接种45天龄鸡4只（未接种过新城疫和脑脊髓炎疫苗），其中两只肌肉注射3毫升/只，另两只肌肉注射1毫升/只。观察10天，结果4只鸡均未见有任何临床症状出现。（2）将10天龄小鸡6只平均分为2组，每组3只。取无菌检查合格的胚液1毫升，按10的倍比稀释至100倍，第1组肌肉注射接种0.5毫升/只；第2组肌肉注射接种原胚液0.5毫升/只；观察14天，记录鸡只的病状及死亡情况，结果第2组于接种后48小时3/3死亡；第1组于接种后72小时3/3死亡；出现明显症状，发病初期表现为精神不振、目光呆滞、嗜睡，随后发生进行性共济失调，尤其是被驱赶而走动时两翅张开以保持平衡，同时表现不能控制速度和步态，最终倒卧一侧或轻瘫，以跗关节着地，坐于脚踝，不愿走动，或以跗关节着地爬行，明显的头颈震颤。随着病情的加剧，由于得不到食物和饮水导致身体衰弱而无法站立，倒卧于食槽旁，发出痛苦的叫声，症状与发病鸡群相似。接种后48～72小时，由于无法进食和饮水及鸡只之间践踏，最终归于死亡。（3）剖检变化。剖检死亡的鸡只，病死鸡小脑水肿、充血，脑膜上有出血点，个别雏鸡大脑水肿、脑膜充血；腺胃肌层中有散在的细小灰白色坏死区；关节滑膜增厚、充血，关节囊充满纤维素性渗出物。其他脏器未见明显肉眼病变。4.病理组织学检查：取病死鸡只的全脑、部分脊髓、肝脏、胰腺和十二指肠、肌胃、腺胃、心脏，进行病理组织切片镜检。结果是：心肌变性、瘀血、水肿、点状出血；肝脏瘀血，肝细胞变性；腺胃黏膜点状出血、肌层淋巴细胞浸润，胰腺淋巴滤泡灶状增生；小脑瘀血、水肿，大脑水肿、病毒性脑炎并伴灶性坏死，脊髓未见明显病变。五、防制措施1.出现典型症状的雏鸡立即挑出淘汰、焚烧或扑杀深埋，以减轻同群感染。2.将原地面饲养5000只鸡的栏舍用铁网分隔成几个小栏，把大群体分成小群体，避免发病走动不便的鸡只遭踩踏，提供充足的饮水器和饲料桶，以减少死亡。3.鸡群使用0.2%过氧乙酸带鸡喷雾消毒，适当提高育雏舍的温度，给予舒适的环境，消除各种不良的应激因素。4.使用抗生素，防止继发感染，同时在饲料中适当添加维生素E、B及硒，可起到保护神经组织和改善临床症状的作用。5.建议以后购进饲养的鸡苗应选择来自接种过禽传染性脑脊髓炎疫苗的种鸡群。六、讨论1.根据流行病学调查、临床症状、病理病变，结合实验室诊断，确诊该鸡场本次暴发的疫病为禽传染性脑脊髓炎。2.禽传染性脑脊髓炎是由病毒引起的一种主要侵害幼禽中枢神经系统为特征的急性、高度接触性传染病。发病雏鸡的典型症状为共济失调、站立不稳和头颈震颤。病理变化为非化脓性脑炎。生产实践中可根据发病情况、临床症状和药物治疗效果作出初步诊断。3.本病的临床症状易与新城疫、马立克氏病、维生素B1及维生素E-硒缺乏症相混淆，应注意做好鉴别诊断。4.目前，禽传染性脑脊髓炎尚无有效药物进行治疗，弱毒疫苗对雏鸡仍有一定的致病力，不宜用于小日龄雏鸡，但对种鸡而言，开产前接种传染性脑脊髓炎疫苗，可使其产生免疫力并经蛋将母源抗体传递到下一代，这种抗体在雏鸡体内可保留6～8周龄才消失。母源抗体可在关键的2～3周龄内保护雏鸡不受病毒的接触感染。因此，农户或养殖场在购买鸡苗时应选择来自接种过传染性脑脊髓炎疫苗的种鸡场。5.禽传染性脑脊髓炎病毒有很强的传染性，可通过接触进行水平传播，也可通过种蛋垂直传播，因此，种鸡群在生长期接种弱毒疫苗，母鸡开产前2周接种灭活疫苗，可防止病毒感染种鸡并通过蛋源传给小鸡。